Ponente
Descripción
Antecedentes: La enfermedad de Chagas es una enfermedad infecciosa humana causada por el parásito protozoario Trypanosoma cruzi (T. cruzi). La toxicidad o ineficacia de los fármacos actuales determina la relevancia para la búsqueda de nuevos agentes terapéuticos frente a nuevas dianas. Uno de ellos es la leucil-aminopeptidasa ácida M17 (LAPTc) de este parásito, que media la actividad principal de leucil-aminopeptidasa (LAP) en T. cruzi. Los inhibidores potentes de LAPTc son compuestos de bajo peso molecular con sustituyentes hidrofóbicos y voluminosos que interactúan con los bolsillos del sitio activo de la enzima. La identificación de inhibidores de LAPTc, con potencialidades como agentes quimioterapéuticos, es una prioridad en este campo. Objetivos: la identificación de potentes inhibidores de LAPTc en una biblioteca de 49 compuestos sintéticos de bajo peso molecular. Materiales y métodos: Expresamos LAPTc en la bacteria Escherichia coli y purificamos la enzima mediante cromatografía de afinidad de iones metálicos inmovilizados. Se determinó la relación lineal entre la velocidad inicial y la concentración inicial de enzima para el sustrato fluorogénico Arg-7-amido-4-metilcumarina (AMC). Resultados: Tras un cribado con compuestos 100 M y sustrato Arg-AMC, se identificaron siete estructuras con porcentajes de inhibición > 50%. Los estudios dosis-respuesta permitieron identificar una molécula como inhibidor moderado de LAPTc (IC50 = 12,5-50 M) y dos como inhibidores potentes de LAPTc (IC50 = 0,93 y 2,8 M). Estos compuestos tienen anillos de benceno, imidazol y piridina, grupos hidrofóbicos y voluminosos para interactuar con el sitio activo de la enzima. Conclusiones: Los inhibidores P3OME y BFG22, fueron identificados como inhibidores potentes de la enzima LAPTc y representan buenos candidatos para futuros estudios en este campo.
