Ponente
Descripción
El uso de proteoliposomas como transportadores de fármacos lipofílicos ha despertado interés en la comunidad científica, de ahí su empleo como potentes adyuvantes en numerosas plataformas vacunales. Las vesículas de la membrana externa de Neisseria meningitidis poseen un gran número de proteínas como las porinas (PorA y PorB), consideradas potentes adyuvantes inmunitarios que inducen la activación de las Células Presentadoras de Antígeno y actúan como ligando para los receptores tipo Toll (I y II), es por ello que constituyen excelentes candidatos para obtener proteoliposomas por el método de co-solubilización, siendo este el objetivo del presente trabajo. Para ello, la muestra de vesículas de membrana externa se solubilizó en tampones (Trys-HCl) hasta alcanzar una concentración igual a 1 mg/mL y fue separada por Cromatografía de intercambio iónico. La concentración de las fracciones colectadas se determinó por el método del Ácido Bicinconínico, obteniéndose valores entre 0,177 y 0.41 mg/mL. Mediante una electroforesis desnaturalizante en geles de poliacrilamida se evidenció que las PorA y PorB resultaron las proteínas de mayor prevalencia en la muestra. A partir del método de co-solubilización de Dipalmitoilfosfatidilcolina y la fracción proteica más concentrada en Tris-HCL pH 7.5 y SDS al 2,5%, se obtuvo el proteoliposoma, lo que posteriormente se ultracentrifugó y el pellet resuspendido se analizó por el método de dispersión dinámica de la luz, lo que develó un tamaño de partícula aproximado de 1230,85 nm. Estos resultados indican la eficacia del método empleado para obtener proteoliposomas a partir de las proteínas de membrana externa de N. meningitidis.
