Ponente
Descripción
La Interleucina 2 (IL-2) es una citocina con funciones duales en el sistema inmune que estimula tanto células efectoras como poblaciones de células T reguladoras (Tregs), debido a la expresión diferencial de las cadenas de su receptor en estas poblaciones. La IL-2 presenta dos tipos de receptores funcionales: uno dimérico de afinidad intermedia, formado por una subunidad γ y una β, que se expresa en células efectoras; y un receptor trimérico de alta afinidad, compuesto adicionalmente por una subunidad α (CD25), expresado constitutivamente en Tregs. En la actualidad tanto la IL-2 como mutantes derivadas de esta (muteínas) que se obtienen con diferentes propósitos terapéuticos se evalúan in vitro mediante ensayos de proliferación con líneas celulares que expresan el receptor trimérico. Sin embargo estas líneas no reflejan un comportamiento similar al de las poblaciones efectoras que expresan el receptor dimérico, lo que constituye una limitante al evaluar muteínas orientadas a estimular estas poblaciones. En este trabajo generamos las líneas CTLL-2 y Kit 225 knock-out (KO) del CD25 mediante el sistema de edición del genoma CRISPR/Cas9 acoplado a transducción lentiviral. Tras la infección lentiviral se realizó una dilución limitante a partir de la cual se eligieron clones negativos a la expresión del CD25, medido mediante citometría de flujo. Con las nuevas líneas se evaluó la actividad in vitro de un panel de agonistas de la IL-2, obteniéndose un comportamiento diferente al de las líneas salvajes y más similar al de células efectoras. La obtención de estas nuevas líneas celulares constituye una herramienta especialmente útil para la evaluación de muteínas destinadas a estimular a células efectoras, que podrían tener una potencial aplicación en el tratamiento contra el cáncer.
