30 de mayo de 2023 a 2 de junio de 2023 Ciencias Naturales, Exactas y Ténicas
America/Havana zona horaria

Obtención de la construcción genética pLV-CMV-IRES-Puro-CD36noFosfo.

No programado
23h 59m

Ponente

Pablo Remedios Rosa (Universidad de la Habana)

Descripción

El desarrollo de metástasis se ha convertido en un factor crítico para la supervivencia de pacientes con cáncer, por lo que el conocimiento de los mecanismos moleculares y celulares implicados en la colonización de los tejidos podría incrementar la esperanza de vida de los pacientes. Al realizar metástasis las células cancerígenas desarrollan cierta flexibilidad metabólica para adaptarse a las condiciones del medio. Fundamentalmente en el metabolismo energético, donde debido a la reducción del transporte de glucosa al interior celular, comienzan a internalizarse AG, cuya β-oxidación permite el mantenimiento del nivel energético, participando en este proceso translocasas lipídicas como CD36. Estudios demuestran que dicha proteína posee sitios de palmitoilación, ubicuitinación y fosforilación, además como se conoce que algunos modelos tumorales con baja expresión de esta proteína no realizan metástasis, se ha propuesto obtener una construcción genética para expresar dicha proteína mutada en su sitio de fosforilación en un modelo murino. Para ello se extrajo el ARN total de la línea celular J774 y se obtuvo el ADN que codifica para dicha proteína con una mutación en este sitio utilizando técnicas de PCR, esto permitió la obtención y amplificación del transcripto CD36noFosfo, el cual pudo clonarse en el vector pLV-CMV-IRES-Puro y se transformaron bacterias de la cepa TG1, en estado de competencia, con la construcción genética pLV-CMV-IRES-Puro-CD36noFosfo. Mediante PCR se seleccionaron las colonias recombinantes evidenciando la posibilidad de su obtención a partir de la transformación con la construcción genética obtenida.

Autor primario

Pablo Remedios Rosa (Universidad de la Habana)

Coautor

Raquel Morera Domínguez (Universidad de la Habana)

Materiales de la presentación

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