Ponente
Descripción
La malaria es una enfermedad parasitaria característica de las regiones tropicales, siendo su agente etiológico más letal el protozoon Plasmodium falciparum. La resistencia al parásito a las drogas tradicionales y la ausencia de una vacuna efectiva imponen la búsqueda de nuevos agentes terapéuticos. La aminopeptidasa M1 de P. falciparum (PfA-M1), que participa en la degradación de la hemoglobina humana, es un objetivo de novedosa validadez contra la malaria. Los potentes inhibidores de PFA-M1 son compuestos de bajo peso molecular con sustituyentes hidrófobos y voluminosos que interactúan con los bolsillos del sitio activo enzimático. La identificación de los inhibidores de PFA-M1, con potencialidades como agentes quimioterapéuticos, es una prioridad en este campo. Por lo tanto, el objetivo de este trabajo fue la identificación de potentes inhibidores de PfA-M1 en una biblioteca de 49 compuestos sintéticos de bajo peso molecular. Para esto, expresamos PfA-M1 en la bacteria Escherichia coli y purificamos la enzima mediante cromatografía de afinidad de iones metálicos inmovilizados. La relación lineal entre la velocidad inicial y la concentración de enzimas iniciales se determinó para los sustratos fluorogénicos Ala- y Met- 7-amino-4-metilcumarina (AMC). Después de un tamizaje con 100 μgm de los compuestos y con el sustrato de Ala-AMC, se identificaron 23 estructuras con porcentajes de inhibición> 50%. A partir de estos, los estudios de dosis-respuesta con el sustrato de Met-AMC permitieron identificar siete moléculas como inhibidores moderados de PfA-M1 ( IC50= 16-62.2 μm) y uno como inhibidor aparentemente potente (IC50= 7.9 μm) Sin embargo, y a pesar presenta actividad antimalárica in vitro con IC50 = 11,82 µM (resultados no publicados), este compuesto se descarta como candidato para futuros estudios en este campo, porque al estudiar su tipo de inhibición se obtuvo un valor de Ki de 37,5 µM lo clasifica como un inhibidor moderado.
Aunque no se obtuviesen resultados relevantes, el análisis estructura- función de los mejores inhibidores de nuestra biblioteca de 49 compuestos puede contribuir al diseño de nuevos inhibidores.
