Ponente
Descripción
Las leishmaniasis son enfermedades causadas por los parásitos protozoarios del género Leishmania, transmitida por insectos dípteros de los géneros Phlebotomus y Lutzomyia. La resistencia emergente y la eficacia reducida de los tratamientos actuales acentúan la necesidad del desarrollo de nuevos fármacos. En este sentido las metalo-aminopeptidasas de parásitos protozoarios están emergiendo como factores de virulencia, blancos de fármacos y potenciales candidatos vacunales. Entre ellas, la leucil aminopeptidasa de Leishmania major (LAPLm), la cual parece estar involucrada en el suplemento nutricional del parásito y ser la principal responsable de su actividad leucil-aminopeptidasa (LAP), ha sido estudiada. De ahí que el principal objetivo de este trabajo sea la identificación de inhibidores potentes de LAPLm en una biblioteca de 49 compuestos sintéticos de bajo peso molecular. Para dar cumplimiento al mismo expresamos LAPLm en la bacteria Escherichia coli, cepa Lemo21(DE3), y purificamos la enzima recombinante mediante cromatografía de afinidad por ion metálico inmovilizado (IMAC). Luego del tamizaje con los compuestos sintéticos a 100 µM y el sustrato Leu-AMC se identificaron 4 compuestos con un porcentaje de inhibición por encima del 50%. A partir de estos resultados, los estudios de dosis-respuesta nos permitieron identificar 3 moléculas como inhibidores potentes de LAPLm (PE3NNEt, JM20 y YMR16 con IC50 de 2,86, 3,72 y 6,46 M, respectivamente) y una como inhibidor moderado (PE3N con un IC50 de 47 M). Estos compuestos presentan en su estructura grupos hidrofóbicos y voluminosos para interactuar con el sitio activo de la enzima, constituyendo candidatos prometedores para futuros estudios en este campo.
