Ponente
Descripción
Nanopartículas magnéticas de óxido de hierro para la adsorción del anticuerpo monoclonal Nimotuzumab.
C. Escalante-Bermúdez1,2, G. González-Ruiz2, D.A. González Martínez3, A.M. Díaz García1, E. González Martínez3, F. Bordallo León1, J. Moran Miraval3, J.A. García2, S. Díaz-Castañón4.
1 Laboratorio de Bioinorgánica, Facultad de Química, Universidad de la Habana
2 Centro de Inmunología Molecular
3 McMaster University
4 Materiales Avanzados, División, IPICYT, México
Resumen
El anticuerpo monoclonal Nimotuzumab es empleado en terapias contra diferentes enfermedades como el cáncer, desórdenes autoinmunes, entre otros. Durante su proceso de purificación se usan métodos cromatográficos de elevado costo y demora. Por otra parte, las nanopartículas magnéticas de óxidos de hierro han sido ampliamente utilizadas en la adsorción y purificación de proteínas debido a sus atractivas propiedades magnéticas y su elevada relación superficie/volumen. En este trabajo se sintetizaron nanopartículas magnéticas de óxido de hierro recubiertas con citrato de sodio mediante el método de coprecipitación y se caracterizaron mediante TEM, DRX, VSM, FT-IR, potencial Zeta, DLS y TGA. Las nanopartículas recubiertas presentaron una morfología esférica, un tamaño de 10 ± 2 nm y una mayor estabilidad coloidal con respecto a las nanopartículas sin recubrimiento. Se estudió la cinética de adsorción del Nimotozumab sobre las nanopartículas recubiertas. El tiempo óptimo de adsorción se encontró entre los 20 y 40 min y la data de la cinética se ajustó al pseudo primer orden. La isoterma de adsorción del anticuerpo ajustó a al modelo de Langmuir y evidenció la formación de multicapas. La interacción de las nanopartículas con las proteínas de las capas posteriores a la primera fue más débil, lo que se evidenció con la pérdida de masa con los lavados previos a la desorción. Por otra parte, la disminución del pH y el aumento de la fuerza iónica favorecieron la desorción del anticuerpo. Finalmente, se demostró mediante electroforesis y Western Blot la integridad de la proteína luego del proceso de purificación del anticuerpo presente en sobrenadante procedente de cultivo celular.
