Ponente
Descripción
Resumen
La tecnología liposomal se ha consolidado como una de las plataformas más prometedoras en nanomedicina. Entre los métodos de preparación, la tecnología de deshidratación-rehidratación destaca por su alta eficiencia de encapsulación de moléculas hidrofílicas y sus condiciones suaves, ideales para biomoléculas sensibles como proteínas. La incorporación controlada de sacarosa durante la etapa de deshidratación constituye una valiosa modificación. En este trabajo se evaluó el efecto de la sacarosa sobre las propiedades físico-químicas de liposomas de composición dipalmitoil-fosfatidil colina : colesterol (1:1) que co-encapsulan la proteína formadora de poros Sticholysina II y la proteína CIGB550-E7, mediante dispersión dinámica de la luz y espectroscopia de fluorescencia. También se evaluó la respuesta inmune inducida por los liposomas mediante ELISpot y un ensayo antitumoral. Los resultados muestran que la sacarosa favorece la obtención de liposomas de tamaño nanométrico y mayor homogeneidad, sin afectar la carga superficial, sin embargo, disminuyó su eficiencia de encapsulación. Además, la sacarosa incrementó notablemente la retención del antígeno CIGB550-E7 durante el almacenamiento a 4 °C durante los primeros 28 días. Finalmente, las formulaciones nanométricas preparadas con sacarosa indujeron una frecuencia ligeramente menor de células productoras de interferón-γ en comparación con las vesículas micrométricas sin sacarosa, sin embargo, ambas formulaciones redujeron significativamente el volumen tumoral en más del 50% en un modelo terapéutico de tumor TC-1, sin diferencias estadísticas entre ellas. En conjunto, la sacarosa optimiza las propiedades fisicoquímicas y estabilidad de los liposomas sin comprometer su potencia antitumoral, posicionándose como un excipiente valioso para el diseño racional de plataformas vacunales.
Palabras Claves: Sacarosa, Liposomas, Sticholysina II, CIGB550-E7, tamaño, eficiencia de encapsulación, interferón- γ, antitumoral
Abstract
Liposomal technology has established itself as one of the most promising platforms in nanomedicine. Among the various preparation methods, dehydration-rehydration technology stands out for its high efficiency in encapsulating hydrophilic molecules and its mild conditions, which are ideal for sensitive biomolecules such as proteins. The controlled incorporation of sucrose during the dehydration stage represents a valuable modification. In this study, the effect of sucrose on the physicochemical properties of liposomes composed of dipalmitoyl-phosphatidylcholine:cholesterol (1:1) that co-encapsulate the pore-forming protein Sticholysin II and the protein CIGB550-E7 was evaluated using dynamic light scattering and fluorescence spectroscopy. The immune response induced by the liposomes was also evaluated using ELISpot and an antitumor assay. The results show that sucrose promotes the formation of nanoscale liposomes with greater homogeneity without affecting the surface charge; however, it reduced their encapsulation efficiency. In addition, sucrose significantly increased the retention of the CIGB550-E7 antigen during storage at 4 °C over the first 28 days. Finally, the nanoscale formulations prepared with sucrose induced a slightly lower frequency of interferon-γ-producing cells compared to the micrometer-sized vesicles without sucrose; however, both formulations significantly reduced tumor volume by more than 50% in a TC-1 tumor therapeutic model, with no statistical differences between them. Overall, sucrose optimizes the physicochemical properties and stability of liposomes without compromising their antitumor potency, positioning it as a valuable excipient for the rational design of vaccine platforms.
Key Words: Sucrose, Liposomes, Sticholysin II, CIGB550-E7, size, encapsulation efficiency, interferon- γ, antitumoral