Ponente
Descripción
Introducción: La hepatitis B constituye un problema global de salud pública, y la cuantificación de anticuerpos monoclonales anti-hepatitis B resulta fundamental para evaluar la respuesta inmune y el control de calidad de vacunas. Objetivos: Validar un ensayo ELISA indirecto para la cuantificación de dichos anticuerpos. Materiales y Métodos: Se empleó un ELISA indirecto con placas recubiertas con HBsAg, evaluando según guías internacionales (CECMED, ICH) los parámetros de especificidad, exactitud, precisión, linealidad, efecto matriz y rango. Resultados: Se demostró especificidad con diferencias significativas (p<0,05) entre placebo y límite de detección (5 ng/mL). La exactitud mostró porcentajes de recuperación entre 87,47-106,99 % en los tres rangos evaluados (alto: 22 ng/mL, medio: 17 ng/mL, bajo: 12 ng/mL). La repetibilidad presentó coeficientes de variación ≤ 8,33 % y la precisión intermedia ≤ 8,57 %. La linealidad alcanzó un R² promedio de 0,9957 y un rango establecido entre 2,1-27,4 ng/mL, sin evidencia de efecto matriz significativo. Conclusiones: El ELISA indirecto validado es específico, exacto, preciso y lineal dentro del rango establecido, cumpliendo con los criterios regulatorios y resultando idóneo para la cuantificación confiable de anticuerpos monoclonales anti-hepatitis B en el contexto del control de calidad de vacunas.
Palabras clave: Hepatitis B, ELISA indirecto, anticuerpos monoclonales, validación.
ABSTRACT
Introduction: Hepatitis B is a global public health problem, and the quantification of monoclonal antibodies against hepatitis B is essential to evaluate immune response and vaccine. Objetives: To validate an indirect ELISA assay for the quantification of these antibodies. Materials and methods: An indirect ELISA with HBsAg-coated plates was used, assessing specificity, accuracy, precision, linearity, matrix effect, and range according to international guidelines (CECMED, ICH). Results: Demonstrated specificity with significant differences (p<0.05) between placebo and detection limit (5 ng/mL). Accuracy showed recovery percentages between 87.47–106.99 % across three ranges (high: 22 ng/mL, medium: 17 ng/mL, low: 12 ng/mL). Repeatability presented coefficients of variation ≤ 8.33 % and intermediate precision ≤ 8.57 %. Linearity reached an average R² of 0.9957 with a range established between 2.1–27.4 ng/mL, without evidence of significant matrix effect. Conclusions: It is concluded that the validated indirect ELISA is specific, accurate, precise, and linear within the established range, meeting regulatory criteria and proving suitable for reliable quantification of monoclonal antibodies against hepatitis B in the context of vaccine quality control.
Keywords: Hepatitis B, indirect ELISA, monoclonal antibodies, validation